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【变态反应】副高考前押题密卷

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变态反应高级职称卫生技术考试知识点

物理查体

变态反应性疾病是体质性疾病,详细的物理查体可以提供诊断的客观依据。由于变态反应性疾病是全身性疾病,因此在全面查体的基础上应特别注意与变态反应性疾病相关的物理体征,而不应仅仅局限于患儿就诊时的单一器官或组织。眼、耳、鼻、咽喉、呼吸道、l腔、消化道和皮肤的体征见表11-1。

综合上述的病史和物理查体,争取达到以下目的:①是否是变态反应性疾病;②所有累及的器官;③可能的诱发因素;④过去的治疗效果。这是由于:

1.几个变态反应性症状常常会同时存在,即使患儿没有把它们作为一个共同的病因联系起来。如果几个症状同时出现,它们更可能源自一个变态反应性疾病。相反,单一系统的单一症状,如孤立的鼻塞可能不是变态反应的症状。

2.变态反应症状多是双侧的,单侧的症状,无论眼部、鼻部或肺部,提示为非变态反应性疾病。

3.大多数变态反应患者有一个特应性疾病的阳性家族史。

4.患者对以前治疗的反应是重要的参考信息,过去治疗的信息是有用的。抗组胺药治疗有效将支持变态反应的可能性。支气管扩张剂、抗介质剂或皮质类固醇疗法,不论全身或吸入的疗效,都将提示是否存在可逆的呼吸道阻塞。免疫疗法有效将会强烈提示一个变态反应性疾病的存在。相反,治疗无效应重新考虑诊断并寻找原因。

5.变态反应的症状常常是间歇性的,即便是一些症状持续的病例,也表现为周期性加重。

6.详尽的病史常常可能发现引起变态反应症状的可疑的变应原。这便于选择诊断性试验和尽量减少试验。患儿的家庭和学校环境的调研可能有助于鉴定潜在的触发物。

同时,应该注意不同类型的变态反应疾病临床表现也有一定的差别:1型变态反应发病急,好发于呼吸、消化、皮肤等系统,有一定的季节性、规律性,病理改变以水肿,分泌物增多,平滑肌痉挛,嗜酸细胞增多为主。故其临床表现常显示为肿胀、瘙痒、皮疹、憋、喘、绞痛、流液等症状为主。Ⅱ型变态反应,病情发展较缓慢,一般于抗原接触后一周以上发病,致敏抗原常为药物、菌苗、疫苗、血型性抗原物质等。临床常表现为溶血、出血、贫血、紫藏、黄疸、继发感染等,常侵害血液的有形成分,血象检查常见有红细胞、白细胞或血小板减少。有时三者可同时减少或形态变异。发病无一定的时间规律。常发生于用药、输血、预防接种等临床处理之后,Ⅲ型变态反应的临床表现为,病情发展更慢,一般发生于长期小量的抗原接触之后数月至数年,或于接触异种血清注射之后1~2周。致敏抗原常为异种血清、病灶性细菌、病毒、支原体、原虫等,亦可能为上述生物性抗原的代谢物。病变常好发生于肾脏,中小动脉周围、心瓣膜、关节周围、关节囊、淋巴组织等。临床表现为蛋白尿,尿中出现红细胞、白细胞、管型。皮内或皮下结节,浸润,压痛。发烧,血沉增快,淋巴结肿大压痛,关节痛,颜面肢体浮肿,肉芽组织增生等。起病前常有一相当长的潜伏期。IV型变态反应的临床表现为,病情发展快慢不一,快者有些皮肤接触性变态反应可于抗原接触后数分钟内发病。但多数V型变态反应的临床表现发生于接受抗原24小时之后。对于组织移植反应等可延长至数周或数月之后出现反应。此类变态反应常可发生于药物外用,细菌或病毒疫苗接种,抗毒血清注射,脏器移植,细菌性抗原接触,自身隐蔽抗原接触,组织外伤等,如眼外伤所致的自身色素膜破损吸收等。病变较常发生于皮肤,中枢神经系统,甲状腺,眼部等。常见的临床表现有皮肤红肿、皮痒、皮疹、渗出,肌张力降低,多发性感觉或运动神经麻痹,甲状腺机能低下,眼部红肿、疼痛、畏光、视力减退等。

变态反应高级职称卫生技术考试知识点

变态反应性疾病柔要免疫学检测技术

变态反应性疾病血清学指标的检测目前普遍采用的是标记免疫分析技术,该类技术包括放射标记免疫分析法(放免法)、酶标记免疫分析法(酶标法)、胶体金标记免疫分析法(金标法)、酶标记荧光免疫分析法(荧光酶标法)和化学发光法等。标记免疫分析技术是通过滤纸、微孔薄膜、聚苯乙烯塑料、纤维素颗粒等固相载体,吸附抗原/

抗体,再利用上述的各种标记分析法对被检测的标本进行定性或(和)定量。

1.放射性过敏原吸附试验(radioallergensorbent test,RAST)其基本原理是根据同位素分析的敏感性和抗原-抗体反应的特异性两大特点综合起来建立的一种检测技术。

最常用于lgE和细胞因子的测定。

以检测血清特异性IgE(slgE)为例:先将某过敏原结合于固相载体上,加入待测血清。如果待测血清中有针对该过敏原的slgE,即形成“固相载体-过敏原-该过敏原的slgE”结合物,再加入放射性核素(如1)标记的抗人lgE抗体,最终形成“固相载体-抗原-slg-核素标记的抗人lg比抗体”的大结合物。利用测定核素的放射性强度来计算血清中slgE的含量。

虽然RAST具有结果准确的优点,但因需一定设备、费时,加之放射性核素有半衰期和一定的放射污染,故目前应用较少。

2.酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)其基本原理是根据酶促反应的高度敏感性和抗原-抗体反应的特异性两大特点综合起来建立的一种定性和定量的检测技术。其中以固相酶联免疫吸附试验(ELISA)最为常用。

ELISA所使用的固相载体是聚苯乙烯塑料多孔板(通用的为96孔板,12×8孔)。以检测血清slgE为例:先将过敏原吸附在固相载体上(96孔板的小孔内),加入待测血清。如果待测血清中有针对该过敏原的slgE,即形成“固相载体-过敏原-该过敏原的slgE”结合物,再加入酶(通常为辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶)标记的抗人lgE抗体,最终形成“固相载体-过敏原-slgE-酶标记的抗人lgE抗体”的大结合物。然后加入底物,借助于酶对底物的催化显色反应,产生颜色,并在规定的时间内加入终止液终止催化反应后,利用颜色深浅的程度来计算slgE含量。底物通常是邻苯二胺(OPD)加H2O,或四甲基联苯胺(TMB)加H,0,。颜色的深浅用酶标仪测定,读取吸光度(A)。

吸光度越高,表示slgE含量越多;反之,则含量越少。由此判断待测血清中slgE的采用ELISA检测slgE,其灵敏度、特异性与RAST相仿,而且价廉、可避免接触放射性核素,酶标抗体相对稳定,保存期较长。由于生物素-亲合素系统(biotin-avidin system,BAS)这一生物反应放大技术的引入,使ELISA检测的灵敏度大大地提高。

EL.ISA现已广泛应用于各种微量生物活性物质的检测,也是目前特异性lgE检测的最普遍的方法。

ELISA的固相载体除用传统的96孔板外,目前越来越多地采用微孔薄膜(常用硝酸纤维素薄膜等)作为固相载体,称为“点酶联免疫吸附试验(Dot-ELISA)”。Dot-

ELISA采用能形成不溶有色物的底物,如以辣根过氧化物酶标记,底物为3,3-二氨基联苯胺,或4-氯-1-奈酚;以碱性磷酸酶标记,则为5-溴-4-氯-3-噪-磷酸酯。结果以薄膜上是否出现有色斑点及颜色深浅来定性或半定量。其特异性强、灵敏度高、过敏原用量少、简便,在检测血清特异性lgE中,与传统ELISA符合率可在90%以上,而且两者的滴度显著相关。最有意义的是Dot-ELISA能一次检测多种过敏原的特异性lgE,对于过敏原的寻找极为有利。

现用于血清特异性IgE检测的商品化试剂盒中,有较多的属于改良的简易Dot-

ELISA法,试剂盒内含测试条及配套试剂,测试条用纸质材料或微孔薄膜制成,一条测试条上有多个区段,每段上吸附相对应的不同过敏原。测试条有多项过敏原组合供选择。结果以测试条某区段是否显色,来确定相对应的过敏原是否阳性,并通过所显颜色的深浅与配套的比色卡对照进行半定量分级。

3.胶体金标记免疫分析法(金标法)金标法的标记物为胶体金,固相载体亦采用微孔薄膜。

胶体金(colloidal gold)也称金溶胶(gold sol),是由金盐被还原成原子金后所形成的胶体。胶体金可与蛋白质等多种大分子物质结合。因胶体金为红色,故结果以微孔薄膜上出现红色斑点或条带为阳性。

金标最常见于快速妊娠试验。目前已逐步开展金标法检测血清特异性lE。如同快速妊娠试验一样,金标法的最大优点在于快速、操作简便,只要滴一滴血清就可以检测,15~20分钟观察结果,检测报告立等可取。但其缺点是灵敏度较低,这在临床应用中应加以注意。目前的金标法只能定性或半定量,无法做到定量。现已有金标特异性1gE的商品化检测,一块测试板(条)能检测多种过敏原的特异性IgE,而且有多项不同组合的检测测试板(条)供应,检测结果以吸附相对应的过敏原区段显示红色条带为阳性。若半定量分级,则将阳性反应条带颜色的深浅与配套的比色卡对照即可。测试板(条)上还有质控区,只有该处显示红色条带才能判断结果,若未显色或颜色很浅,表示检测结果无效。

4.酶标记荧光免疫分析法(荧光酶标法)荧光酶标法(fluorescence enzyme immu-

noassay,FEIA)是一种荧光物作为标记物的免疫分析技术,可看作荧光和酶标技术的结合。该方法使用的标记物是β-半乳糖苷酶(β-galactosidase),底物是4-甲基伞形酮B-D-半乳糖苷(4-methylumbelliferry-β-D-galactoside)。在检测血清特异性IgE的方法中当“固相载体-过敏原-该过敏原的slgE”结合物形成后,加入β-半乳糖苷酶标记的抗人IgE,此酶作用于4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷,使之产生荧光,通过荧光分光光度计测定荧光强度。荧光强度与特异性lgE含量具有相关性,由此可测出血清中特异性lgE的含量。

荧光酶标法的灵敏度和特异性完全可以与放免法相比,且无放射污染之弊,也无需担心放射性核素的衰变给试验的安排带来不便,试剂保存周期大大延长。临床上荧光酶标法目前用于全自动的CAP过敏原检测系统(CAP系统)检测仪进行自动检测。

CAP过敏原检测系统(CAP系统):所谓CAP,就是一个很小的类似“帽状”的新型固相载体,其内置有多孔性、弹性和亲水性的纤维素粒。由于此粒多孔,增加了与过敏原(或蛋白质)接触的表面积,可吸附更多的过敏原或蛋白质,是普通载体的数十倍。由于反应在孔内进行,故抗原抗体的反应距离缩短,反应可迅速达到平衡,缩短了检测时间;纤维素粒具有弹性,可进行自动化挤压式冲洗,将未被结合的物质洗掉。以上仪器、试剂与计算机软件合称CAP系统。CAP系统在检测方法上采用先进的荧光酶标法,且提供商品化试剂,全自动检测并打印出结果。它既可检测混合的过敏原,又可检测单一品种的过敏原。目前提供的商品化过敏原检测品种有500多种。

采用CAP系统进行检测,不但灵敏、可靠,而且检测时间(从进样到输出结果)仅需3小时,给临床工作带来了极大的方便。CAP系统不但能够检测过敏原特异性1gE,还能检测多种过敏性疾病的重要指标,如总IgE、嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)、类胰蛋白酶、lgA、IgG以及许多自身免疫性疾病的指标等。

目前,CAP系统已成系列产品,分别适合不同的标本量及实验室规模。

5.化学发光酶免疫分析法(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLElA)化学发光酶免疫分析法是利用物质的发光特征,将化学发光与免疫反应相结合,用以检测抗原或抗体的方法。该方法属非放射性技术,兼备免疫反应的高特异性和化学发光反应的高敏感性。

某些化合物在常温下由化学反应产生光的发射,即发光底物。化学发光底物常采用AMPPD。AMPPD是碱性磷酸酶(ALP)的底物,AMPPD经ALP催化后能持续发光,其发光强度与ALP活性具有相关性。AMPPD具有反应快,发光连续稳定,线性范围宽等优点。

在1gE的检测方面,化学发光酶免疫分析法目前主要采用全自动化学发光检测仪测定血清总lgE,并有商品化试剂盒供应;而在血清特异性lgE检测上,有1次检测30多种过敏原的Mast检测法。

随着科学技术的不断发展,各种检测方法层出不穷地出现。现代免疫学体外检测技术,除了精确、快速、微量以及商品化和标准化等特点外,还朝着自动化(适合大批量的标本检测,如CAP过敏原检测系统)和简易化(适合单份标本即等报告的检测,如上述的金标法)两大方向发展。随着我国经济建设的发展,这些新技术、新方法将越来越得以普及。

6.分子生物学方法包括原位杂交法和逆转录酶-聚合酶链反应(RT-PCR)法等,它们均从mRNA水平检测细胞因子和粘附分子,前者为定性但能阐明表达细胞因子或粘附分子的细胞类型,后者十分灵敏,可检测数个细胞产生某种细胞因子或粘附分子的能力。

7.免疫组织化学法这是免疫学和组织学相结合的方法,从其检测结果可准确地判断细胞因子和粘附分子作用的部位。

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考试简介

卫生高级职称考试
考试简介:卫生高级资格考试是由人力资源和社会保障部、卫生部共同组织的全国性质高级职称医学专业考试(正高副高——主任医师,副主任医师)。
报名时间:2020年2-57月份(各地具体时间不同)各省报名时间可以看这里:
(2020高级卫生职称各省报名时间)
考试职级:正高(主任医师),副高(副主任医师)。
考试时间:每年一次,一般在4月份9月份,各省高级卫生职称考试时间不尽相同。各省具体考试时间可以看这里:
(2020高级卫生职称各省考试时间)
考试时长:120分钟,需要注意的是卫生高级职称医学检验正高副高考试,为上机考试,到达时间后会自动交卷,请考生注意时间。
考试题型:正高:多项选择题和案例分析题。副高:单选题、多项选择题和案例分析题。
复习方法:购买高卫押题密卷(答案预测),购买历年真题试卷答案,购买最新教材。
合格标准:满分100分,每科成绩达到60分合格,特殊地区除外(青海48分,甘肃55分,四川57分等)
成绩公布:分数一般会在一两个月后公布,考生可登陆“中国卫生人才网”进行查询。

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